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如何选择合适的核酸提取仪

发布时间:2022-03-10      点击次数:110

随着生物技术的快速发展,伴随着PCR技术在各个领域的应用,包括医学疾病检测、农业转基因检测等诸多应用,从样品中高通量提取核酸变得极为迫切。很多公司都推出了全自动核酸提取仪,原理各种各样,有的没用,有的很贵。如何选择合适的自动核酸提取仪,一定要仔细分析,才不会浪费钱。

核酸提取仪是一种通过使用匹配的核酸提取试剂从样品中自动提取核酸的仪器。广泛应用于疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业、分子生物学研究等诸多领域。

博科全自动核酸提取仪

核酸提取仪分类

1.根据不同的仪器型号和尺寸。

1)自动液体工作站

自动液体工作站是一个非常强大的设备,它可以自动完成液体的分离和吸取,甚至通过集成扩增和检测功能,实现样品提取、扩增和检测的全自动化。提取核酸只是其功能的一个应用,不适合常规实验室提取核酸。它一般适用于单一类型样品和一次大量样品(至少96个,通常为数百个)的实验要求。自动化工作站平台的建立和运行需要相对较大的资金。

2)小型自动核酸提取仪

小型自动化仪器利用其工作结构的特殊性,可以自动提取核酸,可以应用于任何实验室。

2.根据不同的提取原理。

1)仪器采用离心柱法

离心柱法核酸提取仪主要采用离心机和自动移液装置相结合的方法,通量一般为1-12个样本,操作时间类似于人工提取,不能提高实际工作效率,而且价格昂贵,不同类型仪器的耗材不能通用,只适合资金充足的大型实验室。

2)使用磁珠法的仪器

以磁珠为载体,利用磁珠在高盐低PH值下吸附核酸,在低盐高PH值下分离核酸的原理,通过移动磁珠或转移液体来实现核酸的整个提取纯化过程。由于其*的原理,可以设计成多种通量,单管或8-96个样品即可提取。其操作简单快捷,提取96个样品仅需30-45分钟,大大提高了实验效率,且成本低廉。因此可以在不同的实验室使用,是目前市场上的主流仪器。

磁珠法自动核酸提取仪分为磁棒法和吸引法。

先说抽吸法:顾名思义,抽吸法是通过自动移液装置进行的,加入裂解液和磁珠进行吸附;排出裂解液,加入冲洗液,用磁珠吸附,排出冲洗液,加入洗脱缓冲液。从步骤上看似乎没什么问题,但是抽吸法最大的问题是,为了在去除废液时不抽走磁珠,移液器不能离磁珠太近,防止磁珠和废液被抽走,这样每次抽废液都有一小部分不能被完全抽走, 特别是底部有磁铁的装置,由于磁珠被磁铁吸附在底部,移液器不能太靠近底部,这样冲洗液就不能完全去除,冲洗液中残留的盐和乙醇也会对其产生影响。 磁体一侧的装置内残留液体会少一些,但洗脱效率也不好。除非等待超过半小时,有些96自动核酸提取工作站提取一轮需要150分钟,同样时间的32磁棒法可以用5轮。

先说磁棒法核酸提取仪:磁通通常有8、16、32、96通道。磁棒法与抽吸法相比,优点是每一步的液体都不会残留,因为磁棒只是带走磁珠,转移到下一步对应的反应孔中。另外,磁棒法选择的萃取仪最好功能比较齐全,比如加热,每个加热罐独立控温比较好,可以设置加热。还有一点很重要,驱动磁棒的电机要能带动磁棒快速混合搅拌液体,有利于自动化和彻底的裂解和冲洗。磁棒法的通量选择最好是32通道,96通道的通量看似更高,但有一个很现实的问题。96根磁棒从一个盘子转移到另一个盘子时,磁棒上的液体中途掉落怎么办?会掉在其他孔里造成污染,而32通道的磁棒轨迹不在其他样品上方通过,这样就不会有交叉污染。

磁珠法基本原理概述核酸提取仪

1.抽吸法又称移液法,是通过固定磁珠和转移液体来提取核酸,一般由操作系统控制机械手来实现转移。提取过程如下:

1)裂解:向样品中加入裂解液,通过机械运动和加热使反应液混合并充分反应,细胞裂解,释放核酸。

2)吸附:在样品裂解液中加入磁珠,充分混匀,利用磁珠在高盐、低PH值下对核酸亲和力强的特点吸附核酸,在外加磁场的作用下,磁珠从溶液中分离出来,液体被吸料头移出并丢弃到废液罐中,废弃。

3)洗涤:去除外加磁场,用新的吸头加入洗涤缓冲液,充分混合,去除杂质,在外加磁场的作用下,去除液体。

4)洗脱:去除外加磁场,用新的吸头加入洗脱缓冲液,充分混合,结合的核酸与磁珠分离,得到纯化的核酸。

2.磁棒法

磁棒法是通过固定液体和转移磁珠来分离核酸。原理和过程与吸法相同,不同的是磁珠和液体的分离方式。磁棒法是通过磁棒吸附将磁珠从废液中分离出来,然后放入下一种液体中提取核酸。

磁珠法的特点核酸提取仪

1.可以实现自动化和高通量操作。

2.操作简单快捷。

3.安全环保。

4.高纯度和高收率。

5.无污染,结果稳定。

6.成本低,便于广泛应用。

7.可以同时处理不同类型的样品。

需要注意的事项

1.仪器安装环境:正常大气压(海拔应小于3000米),温度20-35℃,典型使用温度25℃,相对湿度10%-80%,畅通无阻的流入空气35℃以下。

2.避免将仪器放置在热源附近,如电加热器;同时,为了防止电子元件短路,应避免水或其他液体溅入其中。

3.进气口和出气口位于仪器背面,同时避免灰尘或纤维聚集在进气口,保持风道畅通。

4.核酸提取仪离其他垂直面至少10cm,

5.仪器接地:为了避免触电,仪器的输入电源线必须接地。

6.远离带电电路:只有经过认证的专业维修人员才允许操作人员拆卸仪器、更换部件或在机器内进行调整,并且不要在接通电源的情况下更换部件。

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